采用经典光密度分析还是电子成像进行色谱评估?

        装备全套薄层色谱仪器的实验室可以同时采用精度光密度分析和电子成像进行评估。如果由于经济原因必须从中二选一，就需要根据任务要求充分考虑其各自优缺点。

        T LC /H PT LC定量评估需要采用光密度分析，以吸收或荧光模式进行。每个斑点的信号与  没有斑点的薄层板空白背景作比较。对于校正和结果计算，将从未知物上得到的峰数据与同一块薄层板上标准物质的数据进行比较。精度光密度分析或电子成像得到的数据都可以用于定量评估。

        经典光密度分析时采用一束长宽可选的单色光扫描色谱轨道，测定漫反射光。 CAMAG TLC Scanner 3 薄层色谱扫描仪采用光谱范围从 190到800 高光谱选择性的光进行数据采集。可以记录这个范围内的吸收光谱用于物质鉴别和选择最合适的测量波长。

         有关 CAMAG TLC Scanner 3薄层色谱扫描仪和经典光密度分析的更多信息专门的样本:  目录和宣传手册 (pdf)，也可查看客户光盘或我们的网站: www.camag-china.com

经典光密度分析的长处是光源的光谱分辨率高，定量检测的重现性更好。

        目前电子成像工作主要集中在可见光区域。紫外区域－除了对于薄层色谱有用－还是间接的图形采集。就该技术而言类似与人眼。

• 只有经典光密度分析才具有光谱选择性。薄层中添加荧光指示剂，通过荧光淬灭可以对吸收紫外物质的物质进行成像检测，即把检测转移到可见光区域。被定量物质对荧光指示剂激发最大点（254nm ）或附近的吸收越多，图像处理的灵敏度和准确度越高，在 254nm处吸收越小，灵敏度和准确度则越低。

• 只有经典光密度分析才可以记录具有最大吸收、鉴别和把纯度等信息的的紫外光谱。

• 灵敏度和重现性主要取决于测量的分辨率。 scanner 3具有 16 位（65535 值）A/D 转换器，分辨率远远超过8位（255值）普通数码相机和12位（4095 值）高分辨率相机。电子成像采用多色光（白光，UV254或UV366）物体并用数码相机拍摄图像。电子出现已从根本上取代普通照相用于薄层色谱出现存档。电子成像方便存档并能随时调用出于复查或进行定量定性评估。

白光（上）、25 4 nm（中）和 36 6 n m（下）紫外光下的色谱图

电子成像的优势是可以看见色谱的整个图形

能够得到色谱的“视觉印象”是薄层色谱相比所有其它色谱技术的主要优势。

其它优势还有：

• 操作快速二直观；

• 可以得到色谱图像由于以后验证或定量；

• 花费低：如果已有薄层色谱数码成像系统进行成像和存档；只需添加一个评估软件:VideoScan数码图像评价就可以进行定量评估；

对于高精度评估的要求：

• 采用高效薄层板。薄层厚度薄，粒径分布窄以及包装均匀的高效薄层板可以使得斑点扩散小并且背景噪音低。

• 自动非接触喷雾点样技术。只有采用喷雾才能使得点样原点不受点样体积影响，并且样品均匀分布在点样原点上。点样体积增大可以在更大量的物质基础上进行数据采集。

• 使用展开槽条件重现性好的展开槽。按照物质的吸收或荧光性能选择适当的校正工作范围。评估软件提供了合适的校正函数。

• 为被分析物优化光源和测量参数，如狭缝大小、测量波长和扫描速度等。

• 合适的基线校正用于最大化信噪比。

• 衍生化可能是所有检测误差的来源。喷雾试剂分布越均匀误差越小。