点样技术和设备的选择取决于:
点样体积
样品数目
需要的精度和自动化程度.

每次点样前,应在正常光线和紫外灯下检查薄层的损伤情况和杂质,只有无损伤、清洁的薄层板方可使用。一般来说,点样前薄层板要用氯仿-甲醇(8:2)或更强的洗脱溶剂进行预洗,并在105℃下加热干燥1小时,再在室温下放置至少 2小时(需采取保护措施防止空气中的污染物重新附着在薄层上面)。没有预洗的薄层板点样前也最好在105ºC下活化 30分钟。
      
为了提高薄层的分离能力,点样原点在色谱展开方向的大小应尽可能小(HPTLC应小于 1.5mm)。点状点样建议采用能控制进样速度的装置如 Nanomat 4手动点样仪。点样时毛细管应完全充满以垂直方向小心接触板面并完全排空,不损伤薄层,受损的薄层会导致溶剂不规律地流动产生失真的谱带。手动点样体积一般不能超过 5µL,大体积点样建议采用自动控制的装置如 Linomat ATS点样仪,并将样品点成条带状或方型。点样时溶剂在薄层板上扩散会分离样品,使样品组份在点样点上分布不规则,导致展开后斑点扩散不对称,为此选用的样品溶剂溶解性应尽可能小,沸点不宜太低(如乙醚)或太高(如正丁醇)。

条带状或方形点样
采用喷雾点样技术将样品点成细长的条带可确保样品在整个长条上分布均匀,能提高分离度和检测限,低浓度样品还可通过增大点样体积提高分辨率。点样头与薄层板不接触,不会损伤薄层。超大体积点样可将样品点成方形,在色谱分离前用高溶解力的试剂将点样带聚集成窄的条带后再展开。

www.camag.com